[摘要] 白藜芦醇是一类主要存在于葡萄、虎杖、藜芦等植物中的多酚类化合物[1]。白藜芦醇具有抗癌、心血管保护、抗氧化[5]、抗自由基、雌激素调节、抗突变、抗菌消炎、转基因、辐射防护等多方面的药理作用[2]。葡萄皮渣含有较多的多酚物质(如白藜芦醇)[5],但大多被当作肥料抛弃,如加以综合利用,不仅可以减少环境污染,而且还可以获得可观的经济效益。本实验以新鲜的葡萄为材料,采用有机溶剂法提取白藜芦醇,考察影响葡萄中白藜芦醇提取效果的5个因子(提取溶剂种类、提取剂体积分数、提取温度、提取时间、固液比、),通过单因素实验和正交实验确定了最佳提取条件:料液比为1:20,提取时间4.5h,提取温度为75℃,乙醇溶剂浓度为60%。
[关键词] 白藜芦醇; 新鲜葡萄; 抗氧化性
我们一般采用传统方法有机溶剂提取法来提取白藜芦醇,此方法存在周期操作长、工序复杂、提取率低等缺点;但我们考虑到对白藜芦醇提取产量和技术要求等方面,该方法还具有自身的一些优点例如:设备简便、有效成分损失较少。近年来,从一些植物中提取其有效成分过程中出现了许多新技术和方法,例如在企业中使用较广泛的超临界 CO2萃取技术、碱法提取及有机溶剂回流提取技术、超临界超声波提取技术等[13]。通过新技术的开发和应用,对白藜芦醇新产品进行大力开发,不仅在减少资源浪费的同时,还能有效的提高产品的附加值,故研究开发与白藜芦醇相关的新产品,有十分重要的经济和社会效益。还对人肝癌细胞的生成有明显抑制作用[3],它还可以通过与人体内雌性激素受体的结合调节血液中胆固醇水平,减少人患心血管病的风险。此外,它是良好的抗氧化剂与体内自由基清除剂[4]。超声波提取可有效提高提取效率,缩短提取时。本文就白藜芦醇的提取工艺进行研究,通过正交实验,对用有机溶剂回流提取法对新鲜葡萄中白藜芦醇提取率的影响,得到最优提取条件,在此基础上优化白藜芦醇的生产分离工艺,可以有效降低其生产成本,对企业提高其经济效益有十分重要的意义。植物、动物和微生物不仅为人类提供了广泛的食物来源,也是人类获取药物和其他多种有价值产品的重要来源。因此,天然产物的提取与分离在天然产物化学研究中占有重要地位。提取是进行植物化学成分研究的第一步,选择适当的提取方法不仅可以保证所需成分被提出,还可以尽量避免被不需要的杂质干扰,简化后续的分离工作。有时只经过一步提取,即可获得植物中的单体成分,因此植物成分的提取和后续的分离纯化密切相关 [10]。
二、实验部分
1、实验原理
本文利用回流装置提取葡萄皮渣中的白藜芦醇。然后根据白藜芦醇的标准曲线计算其质量浓度,从而计算产率。
2、实验仪器和药品
(1)仪器:
分光光度计、恒压漏斗、水浴锅、三颈烧瓶、温度计、粉碎机、容量瓶、烧杯、电热套、铁架台、橡胶管。
(2)药品:
无水乙醇、甲醇、丙酮、去离子水、乙酸乙酯、白藜芦醇标准溶液、新鲜的葡萄。
3、样品预处理
称取一定量的新鲜葡萄清洗干净,放入高速万能粉碎机粉碎。放入烧杯中,通过过滤装置过滤。
4、提取方法
回流提取的单因素实验:各取10g葡萄粉末,在其他条件相同的情况下,分别规定提取溶剂种类、提取剂体积分数、提取温度、提取时间、固液比,以提取液稀释后对应的吸光值为指标,逐个考察各提取条件对提取效果的影响,用紫外分光光度计测其吸光度,由标准曲线计算出样品溶液中的白藜芦醇浓度,进而计算出溶液中白藜芦醇的质量。由白藜芦醇的质量(m1)与葡萄的质量(m2)的比值可以计算出白藜芦醇的提取率(a).a= m1/m2*100%;a为白藜芦醇的提取率; m1为白藜芦醇质量(g);m2为葡萄的质量(g)。
5、标准曲线的绘制
精密称取白藜芦醇标准品容量瓶中,用甲醇溶解并稀释到刻度定容。分别配制不同浓度的标准溶液,用紫外可见分光光度计在 306nm 处测其吸光光度。测得标准曲线为:y=0.1464x+0.0788 (R2=0.9914)式中,y 为吸光度;x 为白藜芦醇的质量浓度。
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